Конъюгаты антитела-лекарственных средств (ADC) действуют путем специфического воздействия на поверхностные антигены опухолевых клеток посредством моноклональных антител (mAbs). Компонент антитела способствует избирательному распознаванию опухолевых клеток и посредством рецептор-опосредованного эндоцитоза позволяет ADC проникать в опухолевые клетки. Внутри в результате гидролиза или ферментативного расщепления высвобождаются низкомолекулярные лекарства, которые убивают опухолевые клетки. Крайне важно проводить фармакодинамические исследования и оценку, основанные на структурных особенностях и технических аспектах АЦП.
Prisys Biotech специализируется на доклинических фармакологических исследованиях, используя в качестве модели макак, питающихся крабами. Мы предлагаем комплексные исследования на крупных-животных, которые предоставляют ценные данные о поведении и эффективности препаратов. Использование передовых технологий и опыта в области конъюгатов антител-лекарств (ADC)фармакокинетика (ПК)ифармакодинамика (ФД), Prisys Biotech поддерживает процесс разработки лекарств. Наши исследования позволяют точно оценить распределение, метаболизм и выведение лекарственного средства, облегчая переход от доклинических исследований к клиническим испытаниям.
1. Оценка эффективности таргетинга ADC
эффективностьADC во многом зависит от механизма адресной доставки компонента mAb. Конъюгация с линкером и молекулами лекарственного средства может изменить сродство моноклонального антитела к сайтам-мишеням, что делает общую эффективность нацеливания критически важной при разработке ADC. Рекомендуется провести тщательную оценку с использованием методов in vitro и in vivo. In vitro такие методы, как Biacore, конкурентный ELISA и проточная цитометрия, могут измерять аффинность связывания ADC с целевыми антигенами. In vivo модели опухолей, экспрессирующие высокие уровни целевого антигена, могут оценить распределение ADC в опухолевых тканях, а альтернативные методы (например, иммуноанализы с радиоактивной меткой) могут использоваться, если стандартный ИФА невозможен. Контрольные группы с антиген-негативными клетками или не-специфическими ADC, а также включение группы препаратов с небольшими-молекулами дополнительно подтверждают характеристики нацеливания ADC.
2. Оценка ADC-опосредованного эндоцитоза опухолевых клеток
Для некоторых ADC эффективность зависит от индуцированного эндоцитоза конъюгата, процесса, определяемого такими факторами, как селективность эпитопа антигена, аффинность связывания и пути внутриклеточного транспорта. На ранней- стадии разработки лекарств необходимо определить наиболее подходящие ADC для эндоцитоза. Кинетику эндоцитоза следует оценивать с помощью таких методов, как проточная цитометрия или конфокальная иммунофлуоресцентная микроскопия. Кроме того, клеточная фармакокинетика, сравнивающая уровни малых-лекарственных препаратов в антиген-положительных и антиген-отрицательных клетках, помогает определить эффективность эндоцитоза. Для ADC, эффективных без эндоцитоза, этот этап оценки можно пропустить.
3. Исследование противоопухолевых эффектов ADC
Тестирование противоопухолевой эффективности ADC проводится аналогично методам in vitro и in vivo, что и другие противораковые препараты. Ключевое значение имеет экспериментальный дизайн, особенно контрольные группы. Предлагаемые контрольные группы включают группу только моноклональных антител-для оценки того, обеспечивает ли ADC превосходный противоопухолевый эффект, нерелевантную группу ADC для проверки целевой специфичности и небольшую контрольную группу-молекул с молярной эквивалентностью целевому ADC. Рекомендуется провести обширные предварительные испытания, чтобы обеспечить эффективный дизайн исследований для противоопухолевых испытаний in vivo и in vitro.
4. Оценка антител-опосредованных эффекторных функций ADC.
Различные подтипы IgG обладают различными эффекторными функциями: IgG1 известен более сильными антитело--зависимой клеточно--опосредованной цитотоксичностью (ADCC) и комплементом-зависимой цитотоксичностью (CDC), тогда как IgG2 и IgG4 более слабы. ADC, которым необходимы усиленные противоопухолевые эффекты за счет эффекторных функций, или те, которым необходимо избежать потенциальной нецелевой токсичности, следует оценить свои Fc-опосредованные функции, особенно если конъюгация может изменить эти функции. Тестирование эффекторной функции имеет решающее значение в случаях, когда голые моноклональные антитела проявляют активность Fc, хотя эффекторные функции обычно не оказывают существенного влияния на эффективность ADC.
5. Оценка ADC, нацеленных на опухолевые -ассоциированные антигены в не-опухолевых клетках
Некоторые ADC нацелены на-связанные с опухолью антигены, экспрессирующиеся не на опухолевых клетках, а на связанных с ними сосудах или строме, что требует уникальных подходов к оценке. Стандартные анализы ингибирования пролиферации клеток in vitro могут оказаться непригодными. Вместо этого для оценки антиангиогенезных ADC рекомендуются анализы, основанные на механизме действия препарата, такие как ингибирование пролиферации HUVEC или тесты на ангиогенез хориоаллантоисной мембраны. Если целевые антигены -специфичны для человека, для фармакодинамической оценки следует использовать альтернативные методы, такие как суррогатные молекулы или гуманизированные модели животных.
Prisys Biotech располагает высококачественным оборудованием-и нанимает команду, имеющую опыт работы в области фармакологии крупных-животных, что позиционирует нас как поставщика услуг по доклиническим исследованиям. Наши исследования ФК и ФД, особенно те, которые проводились сне-приматы, не относящиеся к человеку, предлагают ценную платформу для разработки ADC и других биологических препаратов. Мы призываем вас изучить наши возможности и узнать, как мы можем поддержать ваши программы разработки лекарств с помощью надежной информации,-основанной на данных.
