Базовый скрининг ADA на вымытых-обезьянах для доклинических исследований биологических препаратов

При доклинической разработке биологических препаратов в фармакокинетических, фармакодинамических, токсикокинетических исследованиях и исследованиях безопасности часто используются приматы, не относящиеся к человеку, особенно яванские макаки. Из-за ограниченного количества животных, высоких затрат на исследования и растущей необходимости ускорить сроки разработки, повторное использование «вымытых-обезьян» иногда рассматривается после достаточного интервала-отходов от лекарств.

Однако для биологических препаратов вымывание препарата не обязательно означает иммунологическую перезагрузку. У обезьяны может не быть измеримого остаточного препарата от предыдущего исследования, но при этом сохраняться исходная реактивность антител к-лекарству. Эта реактивность может возникнуть в результате предшествующего воздействия другого биологического препарата, иммунной памяти, перекрестно-реактивных антител или естественного происхождения антител. Если исходный уровень ADA не идентифицирован перед введением дозы, он может повлиять на интерпретацию данных о воздействии, фармакологии, безопасности и иммуногенности.

Поэтому, когда вымытых обезьян рассматривают для нового доклинического исследования, базовый скрининг ADA должен быть включен в процесс квалификации животных. Цель состоит не в том, чтобы напрямую предсказать иммуногенность человека, а в повышении надежности и интерпретируемости данных исследований на животных.

Вымытые-обезьяны не всегда эквивалентны наивным животным. Предыдущее воздействие антител, слитых белков, сконструированных молекул Fc, цитокинов, ПЭГилированных белков или других биологических препаратов может вызвать появление антител, которые сохраняются после выведения исходного препарата. Эти антитела могут распознавать общие структурные элементы в новом тестируемом объекте, такие как области Fc, мутации Fc, шарнирные области, линкеры, гликаны, фрагменты ПЭГ, каркасные домены или другие сконструированные последовательности.

Если такой базовый уровень ADA присутствует до первой дозы нового исследования, может возникнуть несколько рисков. Тестируемый образец может демонстрировать неожиданно низкую экспозицию, более быстрый клиренс, сокращенный период полувыведения, сниженный фармакодинамический ответ или аномальную индивидуальную вариабельность. В некоторых случаях могут образовываться иммунные комплексы, которые способствуют инфузионным реакциям, активации комплемента, высвобождению цитокинов или другим изменениям,-связанным с иммунитетом.

Это создает серьезную проблему интерпретации. Без исходной информации ADA может быть трудно определить, отражают ли аномальные ФК, ФД или профиль безопасности внутренние свойства тестируемого препарата или иммунный анамнез животного.

По этой причине базовый скрининг ADA на-вымытых обезьянах следует рассматривать как показатель качества доклинических данных-. Это помогает определить, подходит ли повторно использованное животное для намеченного исследования и требуют ли какие-либо полученные данные специальной интерпретации.

В целях научной точности термин «ранее-существующий ADA» в этом контексте следует использовать с осторожностью. У людей ранее-существующая ADA обычно относится к антителам, присутствующим до воздействия определенного терапевтического препарата. У отмытых-обезьян исходная реактивность может быть вызвана предыдущим экспериментальным воздействием препарата.

Более подходящие термины включают «исходную реактивность ADA», «реактивность ADA перед-дозой» или «исходную реактивность антител к-тестируемому-статику». Эти термины не подразумевают, что антитела встречаются в природе, и лучше отражают практическую цель оценки.

Базовый скрининг ADA особенно важен, когда-вымытые обезьяны используются в основных исследованиях или исследованиях,-чувствительных к интерпретации. К ним относятся токсикологические исследования GLP, токсикокинетические исследования, формальные фармакокинетические исследования, оценки реакции на воздействие-, оценки запасов безопасности, а также исследования, в которых фармакодинамические биомаркеры играют центральную роль в принятии решений-.

Также возрастает потребность в биологических препаратах со сложными или иммунологически активными структурами, таких как биспецифические антитела, мультиспецифические антитела, слитые белки Fc-, активаторы иммунных-клеток, молекулы на основе цитокинов-, ПЭГилированные белки, сконструированные варианты Fc и молекулы, содержащие неприродные линкеры или новые каркасные домены.

Для исследовательских исследований или исследований, не относящихся к -GLP, стратегия скрининга может быть упрощена. Однако даже в ранних исследованиях необходимо собирать и сохранять образцы перед-дозой. Если позже возникнут неожиданные потери воздействия, слабая фармакология или результаты, связанные с иммунитетом,-эти образцы могут помочь в ретроспективном исследовании.

Прежде чем направлять-вымытых обезьян на новое исследование биологического препарата, можно использовать систему,-ориентированную на оценку риска.

Во-первых, следует просмотреть записи исторических исследований животного. Важная информация включает в себя предыдущий тестовый образец, молекулярный формат, уровень дозы, способ дозирования, продолжительность дозирования, дату последней дозы, период вымывания, предыдущий статус ADA, предыдущий профиль воздействия препарата, инфузионные реакции, результаты, связанные с иммунитетом-, и данные о выздоровлении.

Во-вторых, до начала нового исследования необходимо собрать образец сыворотки или плазмы перед введением-дозы. Для животных со сложным предшествующим воздействием или с коротким интервалом отмывания повторный отбор проб может быть полезен для определения того, является ли реактивность антител стабильной, снижающейся или колеблющейся.

В-третьих, базовую реактивность анти-тестовых-статей следует оценивать с помощью анализа ADA, пригодного-для-цели. Анализ не всегда требует полной валидации на уровне, необходимом для клинического тестирования иммуногенности, но он должен быть пригоден для отбора животных и интерпретации данных. Как минимум, это должно помочь отличить вероятные сигналы, специфичные для -статьи-теста, от неспецифического фона.

В-четвертых, положительные животные должны быть классифицированы по уровню риска. Низкий-уровень или пограничный уровень реактивности могут быть приемлемыми в некоторых исследовательских условиях, особенно если животные сбалансированы по группам. С умеренной реактивностью следует обращаться осторожно и интерпретировать вместе с данными ФК, ФД и безопасности. Сильная исходная реактивность, подтвержденная специфичность, высокий титр или нейтрализующий потенциал обычно должны исключать животное из основных исследований или исследований, которые в значительной степени полагаются на интерпретацию воздействия.

В-пятых, базовые результаты ADA должны быть интегрированы с наблюдениями в-исследованиях. Исходное животное с -положительным результатом по ADA, у которого позже наблюдается быстрый выведение препарата, низкая экспозиция, аномальный ответ на PD или результаты иммунной-безопасности, следует интерпретировать иначе, чем исходное-отрицательное животное с аналогичными наблюдениями.

Базовый скрининг ADA не следует рассматривать как простое упражнение «да-или-нет». Его ценность заключается в поддержке лучшего отбора животных, группового распределения и интерпретации данных.

Для ключевой токсикологии GLP или ключевогоТЗ исследованияКак правило, следует избегать животных с высокой исходной реактивностью ADA. Если необходимо использовать-вымытых обезьян, обоснование должно быть научно обосновано, а исходный статус ADA должен быть четко задокументирован в файле исследования и итоговом отчете.

Для исследовательских исследований ФК/ФД можно использовать животных с низким-риском, а животных с умеренным-риском можно зарезервировать в качестве резервных или равномерно распределить по группам. Животных с высоким-риском не следует относить к группам критических доз, если исследование специально не предназначено для оценки воздействия исходного уровня ADA.

Организациям, которые регулярно повторно используют обезьян, настоятельно рекомендуется иметь внутреннюю базу данных иммунологии животных. Эта база данных должна фиксировать предыдущее биологическое воздействие каждого животного, историю ADA, интервал отмывания, базовую реакцию на новые тестируемые образцы, ФК.поведение, наблюдения за безопасностью и результаты повторного использования. Со временем такие данные смогут обеспечить более обоснованный-отбор животных и снизить неопределенность в интерпретации доклинических исследований.

Базовый скрининг ADA у отмытых-обезьян имеет очевидную ценность, но имеет ограничения. Результаты ADA на обезьянах не могут использоваться в качестве прямой замены оценки риска иммуногенности человека. Видовые различия в иммунном анамнезе, репертуаре антител, биологии рецепторов Fc, активности комплемента и воздействии окружающей среды ограничивают прямую трансляцию на человека.

Кроме того, исходный положительный результат ADA не всегда означает, что животное непригодно. Некоторые сигналы низкого-уровня или не-нейтрализующие сигналы могут иметь ограниченное влияние на конечные точки исследования. И наоборот, отрицательный исходный результат не исключает полностью возможность лечения-неотложной помощи ADA во время исследования.

Формат анализа, качество реагентов, стратегия точки отсечения, толерантность к лекарственному средству, взаимодействие с мишенями и эффекты матрицы также могут влиять на результаты. По этой причине исходные данные ADA всегда следует интерпретировать вместе с концентрацией препарата, фармакодинамическим ответом, клиническими наблюдениями, цитокинами, маркерами комплемента, результатами патологии и предшествующим анамнезом животных.

Использование-вымытых обезьян в доклинических исследованиях биологических препаратов может быть разумным с научной и этической точки зрения, если должным образом контролироваться история животных, клиренс препарата и иммунологический фон. Однако одного только вымывания препарата недостаточно. Для биологических препаратов исходная реактивность ADA может сохраняться и влиять на воздействие, фармакологию, сигналы безопасности и интерпретацию иммуногенности.

Стратегия базового скрининга ADA, подходящая-для-цели, обеспечивает практический способ квалификации-вымытых обезьян перед повторным использованием. Это помогает идентифицировать животных с высоким-риском, поддерживает сбалансированное распределение групп, улучшает интерпретацию данных и снижает вероятность ошибочных заключений по ФК, ПД или безопасности.

Самый подходящий подход — не отвергать всех-обезьян, а использовать их в рамках структурированной,-основанной на доказательствах системы риска. Поэтому базовый скрининг ADA должен стать частью стандартной предварительной-оценки перед исследованием, когда-вымытых обезьян рассматривают для разработки биологических препаратов.

Свяжитесь с Prisys Biotech